原创《适配体生物传感器快速检测鼠伤寒沙门氏菌》
该文是关于生物传感器专升本论文范文跟生物传感器和沙门氏菌和伤寒相关论文范例。
摘 要：沙门氏菌是一种食源性致病菌,能够引起肠胃炎、腹泻以及疼痛.传统的检测技术需经过预增菌以及生化试验、血清学试验等一系列复杂繁琐的操作,检验周期长、检验效率较低.本研究通过合成一种羧壳聚糖-分子信标-金纳米材料,采用一种新的基于分子信标共价功能化的壳聚糖技术和金纳米团聚比色的方法对含SSeC基因的鼠伤寒沙门氏菌沙门氏菌进行检测.结果显示：这种方法具有较好的灵敏度和特异度.
关键词：鼠伤寒沙门氏菌；适配体；生物传感器
一、实验方法
1.生物传感器的合成.
向30mg/mL的羧壳聚糖溶液中加入NHS 0.17g,搅拌15min,然后在2℃冰水浴搅拌器中,缓慢滴入1-乙基-3-（二氨基丙基）碳二亚胺（EDC）的水溶液.10min滴加完成后,仍在冰水浴下继续搅拌反应1h,使羧壳聚糖的羧基充分活化.取1mL自制纳米金溶液于EP管中,4℃、10000r/min离心10min,弃上清,重悬.向纳米金溶液中加入配好的羧壳聚糖-适配体复合物100μL,混匀,置于37℃摇床中孵育30h.为除去可能过量的适配体,将上述混合液在4℃、10000r/min离心10min,弃上清,最终得到羧壳聚糖-适配体-纳米金材料,4℃避光保存备用.
2.靶标DNA的检测.
羧壳聚糖-分子信标-金纳米复合物100μL,加入靶标DNA,使靶标DNA终浓度为0.50nmol/L、100nmol/L、200nmol/L、300nmol/L、400nmol/L、500nmol/L,于37℃孵育30min.加入1.5mol/L的NaCl溶液使释放出的金纳米颗粒团聚,观察溶液,若有颜色变化（红变蓝）,则实验可行.用紫外可见分光光度计检测最大吸收波长（520nm左右）的吸光度A值,进行定量测定.
3.特异性试验.
将鼠伤寒沙门氏菌在液体营养培养基于95℃水浴15min,置冰上10min以获取相应的ssDNA,加入100μL配好的羧壳聚糖-分子信标-金纳米复合物,于37℃摇床孵育1h.加入1.50mol/L的氯化钠溶液,混匀,观察溶液颜色变化,用紫外分光光度计检测520nm的吸光度A值.另外取金葡萄球菌、大肠埃希氏菌、单核细胞增生李斯特菌（5×107CFU/mL）的DNA,在相同的条件下进行样品检测以证明该方法对于鼠伤寒沙门氏菌的特异性.
二、结果
1.靶标DNA的检测.
不同浓度的靶标DNA检测结果如图1所示,随着靶标DNA浓度的增加,溶液的吸光度值也不断增加,在靶标DNA浓度为0.05μmol/L-0.5μmol/L的范围内与吸光度值呈线性关系,表明该方法在一定范围内可以对靶标DNA进行定量检测,按照3S/K计算出该方法对靶标DNA的检测下限为50nmol/L.
取不同类别的细菌在相同的条件下进行检测,检测结果如图2所示,加入鼠伤寒沙门氏菌的吸光度值远远大于其他三种细菌,因此表明了只有含有SSeC基因的鼠伤寒沙门氏菌才能使靶标DNA分子信标解崩释放出金纳米粒子,从而产生显色反应,从而说明该检测方法对于鼠伤寒沙门氏菌具有较强的特异性.
本研究设计了一种新颖的、快速的基于分子信标共价功能化的壳聚糖技术和金纳米团聚比色的生物传感器用于检测鼠伤寒沙门氏菌,该传感器用于检测含有SSeC基因的鼠伤寒沙门氏菌,其检测下限可以达到50nmol/L,并且在DNA浓度为0.05μmol/L-0.5μmol/L的范围内具有良好的线性关系,并且该种检测方法具有较好的选择性和特异性.（基金项目：
湖南省食品药品监督管理局食品药品安全科技项目.项目编号：湘食药科R201704.）
生物传感器论文参考资料：
上文结论:此文是关于生物传感器和沙门氏菌和伤寒方面的相关大学硕士和生物传感器本科毕业论文以及相关生物传感器论文开题报告范文和职称论文写作参考文献资料。
