原创《猪博卡病毒的流行特点和检测方法》
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博卡病毒为细小病毒亚科的博卡病毒属,细小病毒分为浓病毒亚科和细小病毒科亚科,浓病毒亚科主要感染昆虫,细小病毒科亚科主要感染脊椎动物.细小病毒亚科又分为貂阿留申病毒属、细小病毒属、红病毒属、博卡病毒属和依赖病毒属等.博卡病毒是无囊膜单股线状D N A病毒,全基因5.2k b,病毒直径为25～30纳米.博卡病毒包括牛细小病毒、大猩猩博卡病毒、犬极细小病毒、猪博卡病毒和人博卡病毒1～4型等.目前,已成功分离的猪博卡病毒有5个基因型——猪博卡病毒1～5型,都含有2个主要的开放式阅读框,编码非结构蛋白和衣壳蛋白.博卡病毒最早在2009年在患断奶仔猪多系统衰竭综合征病猪的淋巴结中检出,同年猪博卡病毒在我国养殖场被检出.博卡病毒在猪的不同组织中检出率不同,即使在无临床症状的猪组织中也可检出,博卡病毒与圆环病毒常混合感染.猪博卡病毒的致病机理及致病性尚不清楚,病理变化也不明确,关于感染后的症状表现等临床报道较少,检出猪博卡病毒的病猪有明显的呼吸症状及肺损伤.
华中农业大学动物医学院收集2013～2015年间,来自河南、湖北、河北、广东和福建的屠宰场或养殖场的样本,用P C R检测博卡病毒的带毒情况且分析流行特点.结果表明,博卡病毒在我国养殖场和屠宰场广泛分布,总流行率37.92%；在不同样本类型中,粪便检出率最髙（59.62%）、血清36.59%、肠系膜淋巴结36%、淋巴结最低仅为2.94%.中国动物卫生与流行病学中心等单位从屠宰场采集猪扁桃体、淋巴结和脾脏等组织,采用套式P C R分别检测博卡病毒1型和2型,28份样品中有2份样品为阳性,且均为猪博卡病毒2型感染.上海市动物疫病预防控制中心利用实时荧光定量P C R检测,采集于上海规模养殖场的1800份猪血清、猪粪便、猪鼻棉拭及高热病死猪内脏,阳性率分别为24%、30%、0%和67%.6份博卡病毒阳性病料进行与猪繁殖呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病毒、猪细小病毒检测,阳性率分别为83%、100%、0%和0%,表明博卡病毒感染在上海普遍存在,猪内脏中检出率较高,春秋高发,并与猪繁殖呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型混合感染.
目前,猪博卡病毒的检测方法主要有病毒细胞培养、酶联免疫吸附试验、间接免疫荧光技术、聚合酶链反应和反转录－聚合酶链反应.四川农业大学动物生物技术中心根据GenBank发布的博卡病毒的不同基因型序列,分别设计猪博卡病毒1～5型的PCR引物,在分别建立单一PCR基础上,通过对两组引物的比例、退火温度等条件的优化,建立同时检测猪博卡病毒1型/2型和猪博卡病毒3型/4型/5型的双重PCR法.
检测方法论文参考资料：
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